检测原理
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胞外多糖(EPS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并C底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最Z的黄色。颜色的深浅和样品中的胞外多糖(EPS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒 样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒 操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶全部溶解后再使用。
1. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
2. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
3. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
4. 所有液体组分使用前充分摇匀。
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒 试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒 洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒 试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最D检测浓度小于1.0EU/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
1. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
2. 有效期:6个月
胞外多糖(EPS)ELISA检测试剂盒 免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
我司将紧跟生命科学的发展动态,为广大科研学者探索生命的奥秘而奉献绵薄之力,希望通过我们的不懈努力能为科研事业做出更大的贡献!