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大鼠DNA甲基转移酶1 (ELISA)试剂盒
大鼠DNA甲基转移酶1 (ELISA)试剂盒
双抗体夹心法
1. 包被:以 0.05 MPH 稀释抗体至蛋白质含量为 1-10 μg/ml。 9. 含氧碳酸盐涂层缓冲液。在 4 °C 下将 0.1 ml 添加到每个聚苯乙烯板的反应孔中过夜。次日,将溶液从孔中取出并用洗涤缓冲液洗涤3次,每次3分钟。 (以下也清洗)。
2、加样:将0.1ml特定稀释度的待测样品加入上述包被的反应液中,37℃孵育1小时。然后洗。 (同时创建空白孔、阴性对孔和阳性对照孔)。
3. 酶标抗体的加入:每个反应孔中加入新鲜稀释的酶标抗体(滴定后稀释)0.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小时并洗涤。
4、加入底物溶液显色:在每个反应孔中加入0.1ml临时配制的TMB底物溶液,37℃孵育10-30分钟。
5. 反应结束:每孔加入 0.05 ml 2M 硫酸。
6、结果评价:在白色背景上可以用肉眼直接观察结果。反应孔越深,阳性反应越强,阴性反应无色或极淡。表示“-"符号。您还可以测量 OD 值。在 450 nm(ABTS 显色时为 410 nm)使用 ELISA 检测器,使用空白对照孔至零,如果大于 OD 值的 2.1 倍,则测量每个孔的 OD 值。阴性对照为阳性。
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