大鼠CD40分子 （ELISA）试剂盒

Elisa 生物检测是一种实验性诊断方法，具有灵敏度高、特异性强、重现性好等特点。 因其试剂稳定、易于储存、操作简便、结果判断客观等特点，被广泛应用于免疫学检测的各个领域。 ELISA检测试剂盒适用于人血清或血浆中抗人戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗体ELISA检测的体外定性检测。

中文名称ELISA试剂盒

外文名ELISA试剂盒

发表于 60 年代和 70 年代

特点：试剂稳定、易储存、易操作。

操作方法

双抗体夹心法

1. 包被：以 0.05 MPH 稀释抗体至蛋白质含量为 1-10 μg/ml。 9.含氧碳酸盐涂层缓冲液。在 4°C 下将 0.1 ml 添加到每个聚苯乙烯板的反应孔中过夜。次日，弃孔中溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，每次3分钟。 （以下也称为清扫）。

2、加样：向上述包被好的反应液中加入0.1ml的特定稀释待测样品，37℃孵育1小时。然后洗。 （同时创建空白孔、阴性对孔和阳性对照孔）。

3. 酶标抗体的加入：每个反应孔中加入新鲜稀释的酶标抗体（滴定后稀释）0.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小时并洗涤。

4、加入底物溶液显色：在每个反应孔中加入0.1ml临时配制的TMB底物溶液，37℃孵育10-30分钟。

5. 反应结束：向每个反应孔中加入 0.05 ml 2M 硫酸。

6、结果的判断：在白色背景上可以用肉眼直接观察结果。反应孔越深，阳性反应越强，阴性反应无色或非常浅。表示“-"符号。您还可以测量 OD 值。用ELISA检测器在450nm（ABTS显色时为410nm），用空白对照孔调零，如果大于OD值的2.1倍，测量各孔的OD值。的阴性对照为阳性。

间接法

1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

2.次日洗涤3次；

3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；

4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；

6.’最后一遍用DDW洗涤。

其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。

可概括四个方面：

1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。

2、研究抗酶抗体的合成。

3、显现微量的免疫沉淀反应。

4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

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