大鼠apelin 12 (ELISA)试剂盒 |
大鼠apelin 12 (ELISA)试剂盒
预防措施
ELISA试剂盒检测时的注意事项
1. ELISA 实验的一般规则
1、为保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平测定。但最好请专业人士纠正。
2、可配20ul、50ul、100ul、1000ul各一支枪。吸出不同的液体后,更换移液器吸头。即使在吸气标准时。
3. 实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,让所有试剂回到室温,使结果更稳定。
4. 实验过程中,基板应避光。
5、用枪吸液体时,速度不能太快,以免产生气泡,吸不准。
6、吸液时,请使用范围接近所需量的枪,以减少误差。
7、在酶标孔中加入液体时,避免吸头与孔内液体接触,使吸头上的液滴与孔壁接触,液滴自然流下。
8. 加完所有液体后,平行轻轻摇动桌面上的ELISA板30秒,使液体混合。也可以使用酶标仪的摇动功能。
9. 温水浴时,用不干胶或胶带纸将ELISA板密封,防止水分蒸发。
10、洗板时,每次加入洗剂后,应静置1分钟,使清洗更*。如果没有洗板机,请在除去液体后在报纸或羊毛纸上将盘子拍干。
11、当洗液不够时,可用蒸馏水配制PH7.4,0.02M磷酸盐缓冲液,加入0.1% Tween 20作为洗液。加入1/1000的后可长期保存。
12、基材对光敏感,使用前应立即准备。
13、检测前,打开酶标仪,使其稳定10分钟以上。
14、底物有一定毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免。
15、待测样品应澄清,否则会影响结果。
16、温水浴时间应符合试剂盒规定。
17、尽量做双孔实验,以保证数据的准确性。
18、结果有问题的样品,应采用其他方法确认。
可以总结为四个方面:
1. 用于定位各种细胞内成分的免疫酶染色。
2.研究抗酶抗体的合成。
3. 出现少量免疫沉淀。
4、体液中抗原或抗体成分的定量检测。
二、以下是我公司ELISA产品存在的问题及解决方法
1、加入反应终止液后,无吸光度值或吸光度值偏低。
一个。原因:没有添加酶标。
解决方法:请按照操作步骤进行。
湾。原因:套件内的物品未全部归还。
解决方案:在继续之前,确保试剂盒中的内容物已恢复到温度。
C。原因:室温太低。
解决方法:如果室温过低(<19°C),请在步骤4中适当延长孵育时间。
d。原因:未使用套件的清洗液进行清洗。
解决方案:请使用套件中提供的清洁液进行清洁。
e.原因:套件已过期。
解决方法:请更换还在有效期内的套件。
2、标准曲线线性差或平行度差。
一个。原因:孵化位置没有很好的避光或气流干扰。
解决方案:确保孵化位置既不透光也不通风(例如在抽屉内)。
湾。原因:操作时间过长。
解决方法:请熟练后操作。
C。原因:微孔之间相互污染。
解决方法:加样时注意不要溅出气孔,以免污染其他气孔。
d。原因:标准物质或酶标添加量不一致。
解决方案:请使用经过校准的移液器,并确保它与吸头良好贴合。
e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。
解决方案:添加样品或试剂时,吸头不应接触微孔。
F。原因:洗版过程出现问题(如管道堵塞,洗版后未立即进行下一步)。
解决方法:请随时监控洗板机的洗涤过程,洗完后立即进行下一步。
3.吸光度值都很高(或者线性度不够陡峭)。
一个。原因:室温过高(>25℃)。
解决方法:如果室内温度不能降低,请适当缩短步骤4中的孵育时间。
湾。原因:底物溶液被污染。
解决方法:如果发现底物溶液呈淡蓝色,请勿使用。
C。原因:反应时间过长。
解决方法:请控制反应时间。
d。原因:酶标仪污染了盒内其他试剂。
解决方法:用过的吸头应立即丢弃,以免试剂相互污染。所有与试剂(尤其是酶标记物和底物溶液)接触过的容器都应立即清洗。 (先用漂白剂浸泡,再用清水冲洗,确保无残留)
4. 阴性标准的吸光度低于阳性标准。
一个。原因:微孔中的试剂没有充分混合。
解决方法:加入试剂后,轻敲盘子使其充分混合。
湾。原因:洗版过程有问题(同2-f.)。
解决方法:请参考2-f。
C。原因:加样量或酶标量不一致。
解决方法:请参考2-d。
该IBL试剂盒可用于小鼠血清、EDTA血浆和细胞上清液中IL-6的定量检测
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