抗体ELISA试剂盒的特异性好,大大降低了检测的假阳性,灵敏度高,采用灵敏的荧光检测系统对荧光信号进行实时监控,操作简单,无PCR产物污染。省去了麻烦的基因序列查询、引物探针设计、PCR扩增条件优化等大量费时、费力、费钱的繁琐工作。
抗体ELISA试剂盒的两种检测模式:
交探针模式(Beacon):分子信标是一种呈发夹结构的茎环寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭,由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。分子信标的茎环结构中,环一般为15-30个核苷酸长,并与目标序列互补;茎一般5-7个核苷酸长,并相互配对形成茎的结构。荧光基团标记在探针的一端,而淬灭剂则标记在另一端。在复性温度下,因为模板不存在时形成茎环结构,当加热变性会互补配对的茎环双链解开,如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后,分子信标将成链状而非发夹状,使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时,因淬灭作用被解除,发出激发光子。由于是酶切作用的存在,分子信标也是积累荧光。
抗体ELISA试剂盒的通用规则:
1、要保证移液枪的准确性,过失不能超过2%。可用水和电子天平进行确认。但有专业人员进行纠正。
2、要配备20ul、50ul、00ul、000ul和排枪各一支。罗致不同的液体后,要更换枪头。即使是罗致标准品时。
3、要在实验前小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使成果更安稳。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪罗致液体时速度不能太快,避免产生气泡而使罗致量不准确。
6、罗致液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少过失。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体触摸,可使枪头上的液滴和孔壁触摸,液滴会天然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行悄悄晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功用。