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背景介绍
酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种基于酶反应检测蛋白质(如致病蛋白、抗原和抗体)的简便方法。这种方法的潜在应用取决于被评估的抗原-抗体反应的特异性和强度。由于ELISA需要使用纯化的抗原和功能特殊的抗体,因此研究人员强烈建议使用其他方法,如LC-MS(液相色谱质谱联用)和各种芯片实验室方法。目前LC-MS诊断的发展趋势是专注于药物和生物标志物(包括多肽和类固醇)的检测,因为很难制备针对这些小分子的合适抗体,基于芯片实验室的平台被认为提供了更容易的样品制备、化学操作和反应,并使用各种新的检测技术。除了该限制外,ELISA法有许多优点,包括简单、实用(如果将其用作比色法,则不需要特殊和昂贵的仪器)、快速和合理的成本。传统的ELISA法的挑战是其检测灵敏度。ELISA夹心法是将识别同一目的蛋白的两个不同表位的抗体固定在固体表面并进行特异性捕获的方法,适用于定量检测。许多研究报告经过一些方法修改后的ELISA法具有很高的检测灵敏度,从而提供了超灵敏的ELISA法。